Gelelektroforese is een van de belangrijkste methoden die in de moleculaire biologie worden gebruikt voor de analyse van DNA.Deze methode omvat de migratie van DNA-fragmenten door een gel, waar ze worden gescheiden op basis van grootte of vorm.Bent u echter ooit fouten tegengekomen tijdens uw elektroforese-experimenten, zoals uitgesmeerde banden op de agarosegel of geen banden op de gel?Wat kan de oorzaak van deze fouten zijn?
Onze technici hebben hier ter referentie een aantal probleemoplossingen samengevat.
1. Uitgesmeerde banden op agarosegel
●Het DNA werd afgebroken.Voorkom nucleasebesmetting.
● De elektroforesebuffer is niet vers.Na herhaald gebruik van de elektroforesebuffer neemt de ionsterkte af en neemt de pH-waarde toe, waardoor de buffercapaciteit verzwakt, wat het elektroforese-effect beïnvloedt.Het wordt aanbevolen om de elektroforesebuffer regelmatig te vervangen.
● Er werd gebruik gemaakt van onjuiste elektroforeseomstandigheden.Zorg ervoor dat de spanning niet hoger wordt dan 20 V/cm en houd tijdens de elektroforese een temperatuur <30° C aan.Voor de elektroforese van de gigantische DNA-streng moet de temperatuur <15° C zijn. Controleer of de elektroforesebuffer voldoende buffercapaciteit heeft.
● Er was te veel DNA op de gel geladen.Verminder de hoeveelheid DNA.
● Te veel zout in het DNA.Gebruik ethanolprecipitatie om overtollige zouten vooraf te verwijderen.
● Het DNA was besmet met eiwit.Gebruik fenolextracties om eiwitten geavanceerd te verwijderen.
● Het DNA werd gedenatureerd.Niet verwarmen vóór elektroforese.Verdun DNA in buffer met 20 mM NaCl.
2. Anomalieën DNA-bandmigratie
● Renaturatie van de COS-plaats van λHindIII-fragment.Verwarm het DNA gedurende 5 minuten onder 65°C vóór de elektroforese, en koel het vervolgens gedurende 5 minuten af op een ijseenheid.
● Er werd gebruik gemaakt van onjuiste elektroforeseomstandigheden.Zorg ervoor dat de spanning niet hoger wordt dan 20 V/cm en houd tijdens de elektroforese een temperatuur <30° C aan.Controleer of de elektroforesebuffer voldoende buffercapaciteit heeft.
● Het DNA werd gedenatureerd.Niet verwarmen vóór elektroforese.Verdun DNA in buffer met 20 mM NaCl.
3. Vage of geen DNA-banden op agarosegel
● Er was onvoldoende hoeveelheid of concentratie DNA op de gel geladen.Verhoog de hoeveelheid DNA.Polyacrylamidegelelektroforese is iets gevoeliger dan agarose-elektroforese en de monsterbelasting kan op passende wijze worden verminderd.
● Het DNA was afgebroken.Voorkom nucleasebesmetting.
● Het DNA werd van de gel geëlektroforeerd.Elektroforese de gel korter, gebruik een lagere spanning of gebruik een gel met een hoger percentage.
● Er werd een onjuiste W-lichtbron gebruikt voor de visualisatie van met ethidiumbromide gekleurd DNA.Gebruik W-licht met een korte golflengte (254 nm) voor een grotere gevoeligheid.
4. DNA-banden ontbreken
●Het kleine DNA werd van de gel geëlektroforeerd.Elektroforese de gel korter, gebruik een lagere spanning of gebruik een gel met een hoger percentage.
● Moeilijk om de DNA-banden van vergelijkbare moleculen te onderscheiden.Verhoog de elektroforesetijd en controleer de concentratievan de gel om er zeker van te zijn dat het juiste percentage gel wordt gebruikt.
● Het DNA werd gedenatureerd.Niet verwarmen vóór elektroforese.Verdun DNA in buffer met 20 mM NaCl.
● De DNA-strengen zijn enorm en conventionele gelelektroforese is niet geschikt.Analyseer met pulsgelelektroforese.Welke andere problemen heeft u gehad met agarosegelelektroforese?We zullen in de toekomst meer onderzoek doen naar gidsen.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) is een gespecialiseerd bedrijf dat zich richt op elektroforese-gerelateerde producten in China.Het verhaal begint in 1970, toen China nog niet aan de hervormingen en openstelling was begonnen.Door jarenlange ontwikkeling heeft Liuyi Bitotech zijn eigen merk, dat bekend staat als het Liuyi-merk op de binnenlandse markt voor elektroforeseproducten.
Het merk Liuyi heeft meer dan 50 jaar geschiedenis in China en het bedrijf kan over de hele wereld stabiele en hoogwaardige producten leveren.Door jarenlange ontwikkeling is het uw keuze waard!
De horizontale elektroforesecellen (tanks/kamers) van Liuyi Biotech zijn van hoge kwaliteit en zien er goed uit.Met verschillende maten geltrays kunnen ze aan uw verschillende experimentele eisen voldoen.We hebben ons eigen technisch team en fabriek.Van ontwerp tot productie, van de grondstoffen tot de belangrijkste onderdelen, wij hebben controle over het hele proces.De DYCP 31-serie is bedoeld voor DNA-elektroforese, die model isDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, EnDYCP-31E.De verschillen tussen hen zijn gelgroottes en prijs.Wij bieden producten in volledige maten voor onze klanten.Het modelDYCP-32Ckan de grootste gel 250 mm * 250 mm maken.
Ondertussen raden wij onze elektroforesevoeding aanDYY-6C,DYY-6DEnDYY-10Cvoor onze elektroforesecellen (tanks/kamers) DYCP-31 en 32 series.
Als u meer informatie over de producten wilt, bezoek dan deze website voor meer informatie. Neem gerust contact met ons op via e-mail om ons te laten weten wat u wilt, en om te zien of we de oplossingen voor u kunnen bieden.
Voor meer informatie over ons kunt u per e-mail contact met ons opnemen[e-mailadres beveiligd], [e-mailadres beveiligd].
Posttijd: 09 mei 2022