Een agarosegel voorbereiden voor elektroforese

Bereiding van agarosegel voor elektroforese

Let op: Draag altijd wegwerphandschoenen!

Stapsgewijze instructies

Agarosepoeder wegen:use weegpapier en een elektronische balans om 0,3 g agarosepoeder te meten (gebaseerd op een 30 ml-systeem).

TBST-buffer voorbereiden:prepareer 30 ml 1x TBST-buffer in een erlenmeyerkolf van 100 ml.

Agarosepoeder oplossen:pVoeg het agarosepoeder toe aan de TBST-buffer en schud goed.Zet ze erinin de magnetron en verwarm (meestal gedurende 50 seconden, afgedekt met aluminiumfolie) tot het volledig is opgelost.

Afkoelen en toevoegen van nuclease:uTrek handschoenen aan om het mengsel uit de magnetron te halen en laat het iets afkoelen in koud water tot het warm is (ongeveer 60°C). Voeg onder schudden 2 µl nuclease (Eb-vervanger) toe om grondig te mengen.

De gelvorm voorbereiden:

• Cleun en droog degelbakje en gelgietapparaatvan de elektroforesetank.
•  Pveter de geldienbladin de binnentank en plaats de kam op een vaste positie.
• Meng de agarosegeloplossing, afgekoeld tot ongeveer 65°C, en giet deze voorzichtig op het mengselgelbakjein degelgietapparaat, langzaam uitspreiden totdat er een gelijkmatige gellaag op de glasplaat ontstaat.
• Laat het bij kamertemperatuur staan ​​totdat de gel volledig stolt.
• Verwijder de kam voorzichtig verticaal en verwijder de tape.
• Plaats de geldienbladin de elektroforesetank.

Belangrijk: Zorg ervoor dat er geen luchtbellen aanwezig zijn in de buurt van de kamtanden. Het oppervlak van de vloeistof moet glad zijn, zonder rimpelingen.

Het uitvoeren van de gel

Het laden van de gel

Nadat de gel is gestold, plaatst u deze in de elektroforesetank en giet u de elektroforesebuffer totdat de gel ondergedompeld is.

Monsters voorbereiden

• Haal de marker en de laadbuffer uit de koelkast.
• Voeg 6 µl laadbuffer toe aan de monsters en meng goed.
• Gebruik een micropipet om de monsters langzaam in de grote putjes van de gel te laden (pas op dat u de gel niet doorboort en niet het hele volume afgeeft om luchtbellen te voorkomen).
• Laad de marker in een van de kleine putten (onthoud de positie).

Elektroforese starten

• Bedek de elektroforesetank en start de elektroforese onmiddellijk na het laden van de gel.
• Stel de spanning in op 60-100V. De monsters migreren van de negatieve elektrode (zwart) naar de positieve elektrode (rood).
• Een hogere spanning verkort het effectieve scheidingsbereik van de agarosegel.
• Stop de elektroforese wanneer de broomfenolblauwe kleurstof ongeveer 1 cm van de onderkant van de gelplaat reikt.

Resultaten observeren

Na het scheiden van de banden stopt u de elektroforese, haalt u de gel eruit en detecteert en fotografeert u deze direct.

Gebruik een gel-beeldvormingssysteem om de banden te fotograferen en te observeren (controleer of er banden zijn voor de marker of monsters).

Nadat je je gelbandkaart hebt verkregen, zoek je de marker. Aan de hand van de marker kunt u de doelbanden bepalen!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) produceert al meer dan 50 jaar elektroforeseproducten. Wij presenteren hier onze horizontale elektroforesesystemenagarose-gelelektroforese.Kiezenhorizontale elektroforesesystemenuit Beijing Liuyi voor uw gelelektroforese-experiment om uw onderzoek in de biotechnologie-industrie te helpen.

Wij bieden verschillende modellen horizontale elektroforesetanks voor het gieten en kleindraaienagarosegels te grootagarosegels

Selectiegids voor horizontale ondergedompelde gel-elektroforese-eenheid

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) is al meer dan 50 jaar gespecialiseerd in de productie van elektroforese-instrumenten met ons eigen professionele technische team en R&D-centrum. We beschikken over een betrouwbare en complete productielijn, van ontwerp tot inspectie, magazijn en marketingondersteuning. Onze belangrijkste producten zijn elektroforesecellen (tank / kamer), elektroforesevoeding, blauwe LED-transilluminator, UV-transilluminator, gelbeeld- en analysesysteem enz. We leveren ook laboratoriuminstrumenten zoals PCR-instrument, vortexmixer en centrifuge voor laboratorium.

Als u een aankoopplan heeft voor onze producten, aarzel dan niet om contact met ons op te nemen. U kunt ons een bericht sturen via e-mail[e-mailadres beveiligd]of[e-mailadres beveiligd], of bel ons op +86 15810650221 of voeg Whatsapp +86 15810650221 toe, of Wechat: 15810650221.

Scan de QR-code om toe te voegen op WhatsApp of WeChat.